大鼠小腸粘膜上皮細胞細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
Saos-2,人成骨肉瘤細胞
Caco-2,人結直腸腺癌細胞
NCI-N87 [N87]人胃癌細胞
MGC80-3(MGC-803)人胃癌細胞
EC109,人食管癌細胞
HGC-27人胃癌細胞
AGS人胃腺癌細胞
U251人膠質瘤細胞
THP-1人單核白血病細胞
HuH-7人肝癌細胞
RBE, 人肝膽管癌細胞
MiaPaCa-2, 人胰腺癌細胞
KM3, 人多發性骨髓瘤細胞
QGY-7701, 人肝癌細胞
PANC-1, 人胰腺癌細胞
U266B1 [U266], 人多發性骨髓瘤細胞
Hep G2, 人肝癌細胞系
PC-12(高分化),PC12,大鼠腎上腺髓質嗜鉻瘤分化細胞株(高分化)
GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤
Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞
QBC-939, 人膽管癌細胞
B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉移細胞
SGC-7901, 人胃腺癌細胞系
SK-N-SH, 人神經母細胞瘤細胞
SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細胞
A549, 人肺癌細胞系
A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株
A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株