人臍帶單核細胞提取物操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
alpha 2 Macroglobulinα2巨球蛋白抗體
ACCSLACCSL蛋白抗體
AFP甲胎蛋白抗體
Mint3β淀粉樣前體蛋白結合蛋白3抗體
ASTN2星形肌動蛋白抗體
TREX1系統性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體
phospho-ATRIP 磷酸化系統性紅斑狼瘡先關蛋白TREX1抗體
Phospho-ATRIP 磷酸化系統性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體
AP2M1接頭相關蛋白復合體AP-2μ鏈1抗體
Phospho-AP2M1 磷酸化接頭相關蛋白復合體AP-2μ鏈1抗體
Annexin A7膜粘連蛋白7抗體
C3orf153號染色體開放閱讀框15抗體
APOB48R載脂蛋白B受體抗體
ABCA2三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白2抗體
ApoB 載脂蛋白B抗體
ALOX15B花生四烯酸15脂氧合酶2抗體
APOC4載脂蛋白C4抗體
ARH低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體
AUP1原始廣泛存在蛋白1抗體
ANKRD37錨蛋白重復結構域蛋白37抗體
A4GALTα1,4-半乳糖基轉移酶1
AGTRAP血管緊張素Ⅱ受體相關蛋白抗體