哪些原因會(huì)導(dǎo)致Elisa試劑盒溢值?
點(diǎn)擊次數(shù):507 更新時(shí)間:2020-12-22
Elisa試劑盒適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型,Elisa試劑盒試驗(yàn)過(guò)程繁瑣,為什么ELISA會(huì)出現(xiàn)“溢值”的現(xiàn)象呢,下面我們來(lái)仔細(xì)說(shuō)說(shuō)。
① 樣品/標(biāo)準(zhǔn)品不正確稀釋。
② 孵育時(shí)刻/溫度不正確。
③ ELISA試劑盒在孵育時(shí)為蓋上酶聯(lián)板覆蓋物:在孵育時(shí)需蓋上酶聯(lián)板覆蓋物,以避免液體蒸騰或孵育期間的污染。每個(gè)試劑盒內(nèi)均有滿足數(shù)量的酶聯(lián)板覆蓋物。
④ 檢測(cè)波長(zhǎng)不正確:要確保分光光度劑的檢測(cè)波長(zhǎng)是正確的。
⑤ TMB底物的顯色時(shí)刻過(guò)長(zhǎng):請(qǐng)監(jiān)控顯色時(shí)刻。闡明書(shū)中所示的顯色時(shí)刻或許因?yàn)闇囟群推渌鼨z測(cè)條件的不同而稍有變化。
⑥ 樣品不適合此檢測(cè):在闡明書(shū)中會(huì)列出每種產(chǎn)品的適用標(biāo)本范圍,超出范圍的標(biāo)本或許不適于此試劑盒或者檢測(cè)條件需要探索。
⑦ 樣品/標(biāo)準(zhǔn)品污染:樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的污染或許會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)成果“溢值”。
⑧ 巧合試劑不正確稀釋?zhuān)阂獓?yán)厲依照說(shuō)明書(shū)來(lái)稀釋巧合試劑,濃度過(guò)高會(huì)形成OD的“溢值”HRP巧合試劑的不正確稀釋
⑨ 所用稀釋液不對(duì): ELISA試劑盒只能運(yùn)用相應(yīng)試劑盒內(nèi)的稀釋液稀釋樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。
ELISA試劑盒的*優(yōu)勢(shì)如下:
、參與反應(yīng)的化酪胺總量與微孔中HRP的量成比例。
2、經(jīng)孵育后,未結(jié)合的化酪胺通過(guò)洗滌去除。
3、洗滌去除未反應(yīng)的化酪胺后,加入信號(hào)擴(kuò)增試劑II與復(fù)合物的多個(gè)位點(diǎn)結(jié)合,此放大步驟可有效增加zui終參與催化TMB底物的HRP分子數(shù)量。