三日瘧原蟲LAMP試劑盒檢測程序：

.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 00ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 20 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液0 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液00ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液00ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)5 分鐘。
8.  每孔加入00ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

操作步驟：

：樣品準(zhǔn)備：取毫升細(xì)胞培養(yǎng)上清（貼壁和懸浮細(xì)胞都可以,*已培養(yǎng)48小時以上），在6000g離心5分鐘，小心棄去上清，避免丟失沉淀（沉淀量有可能很少，目視看不到）。將沉淀用無菌PBS重懸，在6000g離心5分鐘，同樣小心棄去上清，如此反復(fù)用無菌PBS洗三次。*將獲得的沉淀用00微升超純水重懸，置于00℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存到2個月。

2：PCR反應(yīng)的準(zhǔn)備：

待各組份融化后先瞬時離心，然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系，每次實(shí)驗需加一個陰性和一個陽性對照，測試反應(yīng)管可以有多個。配制過程中應(yīng)注意無菌，戴，并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染，在有風(fēng)壓的設(shè)備如超凈臺或生物安全柜中進(jìn)行操作。建議配制完畢后瞬時離心以使液體沉至管底。