購買Elisa試劑盒前,做好攻略了嗎?
點擊次數:480 更新時間:2021-04-22
Elisa試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測,自從60-70年代問世以來,得到科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。
Elisa試劑盒的選購要點:
一、你要明確研究種屬:
一般來說,都會在產品名稱上標明種屬,檢索種屬的常用語言為英文。
如果您需對不同物種的同一因子進行定量,建議優先尋找適用于多個種屬的 ELISA 試劑盒,產品介紹中會注明「Multi-species」。
二、要明確樣本類型:
不同驗證樣本類型不同,即使同一不同試劑盒,其驗證樣本類型也不盡相同。特別是復雜的血漿樣本,根據樣本處理方式的差異,分為 EDTA 血漿、肝素抗凝血漿和檸檬酸鹽血漿,因此購買前需仔細核對。
三、要會預測自己的目標因子的濃度
一般來說,待測因子可以根據經驗或資料獲得參考的檢測范圍,且正常人與疾病狀態存在差異。如熱門炎癥因子 IL-6,正常人血清中濃度為 3.3 pg/mL,病人會顯著增高,CAR-T 回輸病人血清中的 IL-6 濃度甚至為正常人的 200 倍以上。
因而,必要時進行樣本的稀釋及選擇合適檢測范圍的試劑盒十分重要。
若濃度太低,可選擇高敏試劑盒;若不確定待測濃度或樣本間濃度差異較大,建議使用檢測動態范圍更寬的化學發光法ELISA試劑盒。
如同樣為 IL-6 ELISA 試劑盒,各類型檢測范圍差異較大,需要根據實際情況選擇合適的試劑盒。
四、檢查試劑盒進行過哪些質控
質控數據在說明書中即可找到,在購買前檢查試劑盒是否進行過嚴格的質控實驗,包括批次內(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實驗、線性稀釋實驗及交叉反應測試等,每個數據建議都看一下,確保*的結果重現性及準確性。
五、確定需檢測的因子數量
如果待測因子超過 5 個,且樣本量較小時,單因子 ELISA 檢測方法并不是較佳選擇。
建議考慮多因子檢測方法,如固相芯片(樣本數量一般 5 個以內,檢測指標可達上百個)及 Luminex 液相芯片方法 (檢測樣本多達 80 個,檢測指標多達 50 個)或微流控 ELISA 檢測系統 Ella。
可節約樣本及時間成本,也可保證檢測結果準確。
六、預算評估
預算往往是大家優先考慮的,實際上,不能夠一味講究產品價格,更需要考慮性價比。生物學是嚴謹的科學,一致性的實驗結果是基金、文章等評審過程中的因素,即使低廉的價格,不能夠重現結果,也是資源的另一種浪費。