人血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒操作步驟:
. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔0孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品00μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取00μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為80 ng/L,20 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,5 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘.
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘。
人B淋巴母細(xì)胞;HMy2.CIR
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92MI [NK92MI]
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C
人正常乳腺上皮細(xì)胞;MCF 0A
人胚腎細(xì)胞;2V6.
人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B
人肺成纖維細(xì)胞;HFL
人胚肺成纖維細(xì)胞;IMR-90
人胚胎,皮膚,肌肉;M-7
人胚胎,皮膚,肌肉;M-20
人胚胎,皮膚,肌肉;M-22
人正常前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-
人羊膜細(xì)胞;WISH
人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5
人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]
人淋巴細(xì)胞;30
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-7
人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(人膀胱癌細(xì)胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]
人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5
人羊膜細(xì)胞;WISH
;HEL
人正常肝細(xì)胞;L-02
人胚肺細(xì)胞VA3細(xì)胞;WI-38 VA3亞系2RA
人胚肺二倍體細(xì)胞;HL
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C
人胚腎上皮細(xì)胞系;KiMA
人胚肺細(xì)胞系;KuMA
人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5537LC
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN
人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5538LC
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN
人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;AE20