TPS 試劑盒標本激活方法:
1. 將450ul 標本稀釋液加入到一支 1.5ml 進口聚丙烯管中 , 再加 10ul 血清或血漿標本。
2. 加20ul 1 N HC I ,蓋緊,上下混勻。 2 - 8 ℃ 放置60± 2 分鐘。
3. 加20ul 1 N NaOH, 蓋緊,上下混勻。
4. 即用,或放-20/-70 ℃ 保存3 天。計算結(jié)果時乘 以稀釋倍數(shù) 50 。 ( 注意:不同的標本E2F1 的水平可能有較大差異,請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度)
5. 細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿 10 倍稀釋 (410ul 的標本稀釋液+ 50ul 樣本+ 20ul 的 1N HCI+20ul 的 1N NaOH) 。
結(jié)果計算與判斷
1. 所有 OD 值都應減除空白值后再行計算。
2. 以標準品20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 31.2 、 0 pg /ml 為橫坐標, OD 值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。
3. 根據(jù)樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應 E2F1 含量 ,再乘上稀釋倍數(shù)即可 。
試劑盒性能
1. 靈敏度 : 最小的E2F1 檢測濃度小于 15 pg/ml。
2. 特異性: 可同時檢測重組或天然的人 E2F1 。 不與 人其它細胞因子有交叉反應。
3. 重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9%。
人骨肉瘤細胞;HOS
人慢性髓系白血病細胞;K562
人前列腺癌細胞;LNCaP
人乳腺癌細胞;MCF 7B
人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4
人小細胞肺癌細胞;NCI-H209
黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI
人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS
人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1)
人腦瘤細胞;SF126
人腦瘤細胞;SF763
人腦瘤細胞;SF767
人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1
人腎上腺皮質(zhì)癌細胞;SW-13
人結(jié)直腸癌細胞;T84
人急性單核細胞白血病細胞;THP-1
人神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤細胞;U251
人組織細胞淋巴瘤細胞;U937 [U-937]
人胃腺癌細胞;BGC-823
人低分化肺腺癌細胞;GLC-82 [GLC82]
人喉癌上皮細胞;Hep-2
人纖維肉瘤細胞;HT-1080
人絨癌細胞;JEG-3
人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3-VP16-TNFa
人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1
人神經(jīng)母細胞瘤細胞;BE(2)-M17