1. 分光光度計/酶標儀預熱30min,調節波長到510 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預熱30 min。
3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A空白管。
4. 標準管:取EP管,加入4μL標準品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A標準管。
5. 對照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸餾水,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。
6. 測定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。
其中標準管和空白管只需做一管,測定管和對照管每個樣均需做。
注意:空白管和標準管只需測定一次。
酶液提取
1. 組織:按照質量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL蒸餾水)加入蒸餾水,冰浴勻漿后于4℃,12000rpm離心10min,取上清置于冰上待測。
2. 細胞:按照細胞數量(104個):蒸餾水體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,12000rpm離心10min,取上清置于冰上待測。
3. 培養液或其它液體:直接檢測。
AMIGO3粘附分子IgG樣結構域蛋白3抗體
AKR1A1乙醇脫氫酶1抗體
ALADδ氨基乙酰丙酸脫水酶抗體
alpha 2 Macroglobulinα2巨球蛋白抗體
ACCSLACCSL蛋白抗體
AFP甲胎蛋白抗體
Mint3β淀粉樣前體蛋白結合蛋白3抗體
ASTN2星形肌動蛋白抗體
TREX1系統性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體
phospho-ATRIP 磷酸化系統性紅斑狼瘡先關蛋白TREX1抗體
Phospho-ATRIP 磷酸化系統性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體
AP2M1接頭相關蛋白復合體AP-2μ鏈1抗體
Phospho-AP2M1 磷酸化接頭相關蛋白復合體AP-2μ鏈1抗體
Annexin A7膜粘連蛋白7抗體
C3orf153號染色體開放閱讀框15抗體
APOB48R載脂蛋白B受體抗體
ABCA2三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白2抗體
ApoB 載脂蛋白B抗體
ALOX15B花生四烯酸15脂氧合酶2抗體
APOC4載脂蛋白C4抗體
ARH低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體
AUP1原始廣泛存在蛋白1抗體