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Elisa試劑盒使用中常見的抗凝劑有哪些?
點(diǎn)擊次數(shù):715 更新時(shí)間:2022-05-18
  Elisa試劑盒的檢測范圍以ng/ml計(jì)。而常見的科研試劑盒中的樣本中的目標(biāo)蛋白,范圍可隨樣本的類型而變化。所以實(shí)驗(yàn)前應(yīng)通過文獻(xiàn)和預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法確定樣本是否在所購的范圍內(nèi),是很重要的步驟。
 
  Elisa試劑盒常見的樣本處理方法:
 
  血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置 2 小時(shí)或 4 度過夜,然后1000×g 離心20分鐘,取上清即可。這是一個(gè)讓血液自然凝固的過程,溫度越低,凝集越緩慢,可根據(jù)需要添加促凝劑。
 
  血漿:血漿樣本需要抗凝,一般建議用2.0%EDTA,1%肝素,3.8%C6H5Na3O7作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2~8度1000g離心15分鐘,取上清即可檢測。根據(jù)待檢測目標(biāo)物的性質(zhì)不同選取不同的抗凝劑。
 
  C6H5Na3O7(檸檬酸鈉):Ca2+有凝血作用,能與血液中的鈣離子形成可溶性的螯合物,從而阻止血液凝固。配成 109mmol/L的濃度和血液1:9, 106mmol/L的濃度和血液1:4
 
  缺點(diǎn):血液中溶解度低,抗凝作用較弱。
 
  優(yōu)點(diǎn):對凝血因子有很好的保護(hù)作用,大部分凝血試驗(yàn)都可用C6H5Na3O7抗凝。
 
  二胺四乙酸(EDTA)鹽:與血液中的鈣離子結(jié)合形成配位化合物, 從而阻止血液凝固。15g/L EDTA和血液 1:10
 
  優(yōu)點(diǎn):對紅細(xì)胞和白細(xì)胞形態(tài)影響小。
 
  缺點(diǎn):影響血小板的聚集。不適用于凝血實(shí)驗(yàn)和血小板功能相關(guān)實(shí)驗(yàn)的檢測。
 
  肝素:通過與抗凝血酶Ⅲ結(jié)合,增強(qiáng)抗凝血酶的作用,滅活絲氨酸蛋白酶,從而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集,阻止血液凝固。肝素鈉 1g/L 與血液 1:10
 
  優(yōu)點(diǎn):抗凝能力強(qiáng)、不影響血細(xì)胞體積、不易溶血、能耐高溫。
 
  缺點(diǎn):引起白細(xì)胞聚集。肝素抗凝血應(yīng)于短時(shí)間內(nèi)使用,否則放置過久血 液又可凝固。

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