丙酮酸脫氫酶(PDH)操作步驟:
. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔0孔,在di一、第二孔中分別加標準品00μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取00μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為80 ng/L,20 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,5 ng/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘.
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘。
內皮細胞活化蛋白受體抗體
效應細胞蛋白酶受體抗體
早期內吞體相關蛋白抗體
胞吞調控蛋白Eps5抗體
真核翻譯起始因子4E抗體
核輸出蛋白5抗體
腸致病性大腸桿菌抗體
E4F轉錄因子抗體
睪酮調節細胞凋亡誘導和腫瘤抑制基因抗體
聚合酶延伸因子2抗體
聚合酶延伸因子抗體
神經生長因子調控抑制蛋白抗體
內皮細胞分化鞘脂G蛋白偶聯受體抗體
紅細胞分化相關因子抗體
微管相關蛋白樣蛋白3抗體
內皮抑素/內皮他丁抗體
雌激素受體β抗體
雌激素受體α抗體
內質網Aβ相關結合蛋白抗體
Ephrin A2抗體
大腸埃希菌菌體蛋白抗體
雌激素硫酸轉移酶抗體
E Tag標簽抗體
登革熱病毒包膜糖蛋白E抗體
食道癌相關基因抗體