肉毒堿棕櫚酰轉移酶(CPT)操作流程描敘:
、將要進行實驗的版孔進行設定好,標準品 5 個點,每個點設定平行,需要用到 0 個孔,空白只需 個孔。剩下孔可以做為樣本孔
2、 稀釋標準,準備好 5 個 EP 管,然后在每個 EP 管中加入 50 微升標準稀釋液,編上編碼,分別為 ,2,3,4,5,在 號管中加入 50 標準品,用槍頭反復吹打 0 次左右(注意控制幅度不要過大容易產(chǎn)生氣泡)如果有渦旋儀可以在渦旋儀上渦旋 5 秒左右,然后換槍頭,在 號管中取 50 微升加入到 2 號管,后面過程一次類推。最后稀釋完,前面 4 個管中每管液體在 50 微升,5 號管為 300 微升。濃度是從大到小。
3、 標準、樣本、空白加樣:標準是每個濃度點 2 個孔(做平行),每孔加入 50 微升,加樣過程中注意換槍頭,樣本孔中每孔加入 50 微升,加樣過程中注意換槍頭,空白孔加入 50 微升標準稀釋液或者樣本稀釋液。特別要說明的是,標準加樣和樣本加樣盡量控制在 5 分鐘內(nèi)加完,如果時間拖的太長,會導致前面孔先反應后面孔才開始反應,這樣數(shù)值偏差過大。加完樣后蓋上封板膜,至 37 攝氏度孵育 30 分鐘.
4、洗版,在孵育過程中可以將洗滌液配好,20 ml30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水或者去離子水定容到 600 ml 即可。每孔加入 250-300 微升的洗滌液(不要漫過版孔),(如果有震蕩儀的話,可以講板子放入震蕩儀上 5 秒左右,然后靜止三十秒,沒有請忽略次過程)將板子在桌子上晃動 5 秒左右,然后靜置 30 秒,甩干,拍板。說明:甩干過程盡量要快, 秒內(nèi)就可以完成,不要慢慢傾斜倒掉液體,直接翻板甩掉液體即可。拍板過程需要在桌子上墊一層吸水紙或者濾紙,版孔朝下拍幾下,拍干區(qū)別主要看吸水紙和濾紙上沒有明顯的水漬為完成。
5、每孔加入 50 微升的酶標試劑,此處在空白孔中不需要加(空白孔為空),孵育 30 分鐘。
6、 洗版同步驟 4
7、顯色,先每孔中加入 50 微升的顯色 A 液,然后每孔中加入 50 微升顯色 B 液。避光 37 攝氏度顯色 5 分鐘
8、終止,每孔加入 50 微升的終止液,注意,加完終止液必須在 5 分鐘內(nèi)讀數(shù),超過時間讀數(shù)無效。在規(guī)定時間內(nèi)讀數(shù)都是有效的。
9、至此,整個實驗結束。
(FK506)ELISA試劑盒
鎖鏈素(DES)ELISA試劑盒
羧甲基賴氨酸(CML)ELISA試劑盒
羧化基質(zhì)蛋白(ucMGP)ELISA試劑盒
羧化不全骨鈣素(ucOC)ELISA試劑盒
髓樣分化因子初次應答基因88(MYD88)ELISA試劑盒
髓樣分化因子88(MyD88)ELISA試劑盒
髓樣分化蛋白2(MD-2)ELISA試劑盒
髓性細胞核分化抗原(MNDA)ELISA試劑盒
髓系細胞觸發(fā)受體-(TREM-)ELISA試劑盒
髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒
髓鞘相關糖蛋白(MAG)ELISA試劑盒
髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒
髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)ELISA試劑盒
髓鞘蛋白P0(MPZ)ELISA試劑盒
髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
髓磷脂P2蛋白(PMP2)ELISA試劑盒
髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒
髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒
酸性鐵蛋白(AIF)ELISA試劑盒
酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)ELISA試劑盒